بررسی اثرات لینولئیک اسید بر روی زنده مانی و بیان ژن bax در رویان های منجمدشده گوسفند

زمینه و هدف: مطالعات زیادی اثر اسید¬های چرب را بر پارامتر¬های تولید مثلی در نشخوار کنندگان بررسی کرده¬اند. اسید¬های چرب قادرند به طور مستقیم در فولیکول نقش ایفا کنند و اثرات آن¬ها می-تواند برحسب نوع اسید چرب در دسترس بافت، تغییر کند. با این حال مطالعات کمی تأثیر لینولئیک اسید را بر رویان نشخوار کنندگان بررسی کرده است. از آن جایی که لینولئیک اسید، از لحاظ بیولوژیکی اسید چرب مهم و فعالی است و در محدوده وسیعی از فرآیند¬های تولید مثلی نقش دارد و تغییر در نسبت در دسترس بودن آن می¬تواند این فرآیند¬ها را تحت تأثیر قرار دهد، لذا هدف مطالعه حاضر بررسی اثرغلظت¬های مختلف لینولئیک اسید بر روی تسهیم و تکوین رویان¬های تولید شده در آزمایشگاه و هم چنین تأثیر آن بر روی بیان ژن bax به عنوان شاخص آپوپتوز می¬باشد. مواد و روش کار: تعداد 450 تخمدان گوسفند بالغ، بلافاصله بعد از کشتار، از کشتارگاه تبریز جمع آوری و در دمای 30 تا 40 درجه سانتی گراد، به آزمایشگاه انتقال داده شد. بعد از شستشوی تخمدان-ها، اووسیت¬های با دو لایه سلول کومولوس و بیش¬تر استحصال، و در آزمایشگاه جهت بلوغ آزمایشگاهی، در محیط بلوغ کشت داده شدند. اووسیت¬های¬ بالغ شده در گروه¬های تیماری به مدت20 ساعت با غلظت 50، 100 و 200 میکرومولار لینولئیک اسید و کنترل (لینولئیک اسید به محیط لقاح اضافه نشد) در محیط لقاح همراه با اسپرم تهیه شده از دام زنده، تیمار شدند. بعد از 20 ساعت، لقاح ارزیابی، و برای بررسی مراحل رشد و نمو و تکوین رویانی به مدت 48 ساعت در غلظت¬های مذکور لینولئیک اسید در محیط کشت sof کشت داده شدند. رویان¬ها جهت اندازه گیری بیان ژن bax، با استفاده از تکنیک rt real time pcr مورد بررسی قرار گرفتند. یافته¬ها: نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که میزان تسهیم در گروه کنترل بیش¬ترین، و در گروه تیمار شده با غلظت 200 میکرومولار لینولئیک اسید کم¬ترین بود، هر چند از لحاظ آماری تفاوت معنی داری مشاهده نشد. هم چنین میزان تسهیم به صورت وابسته به دوز لینولئیک اسید و با رابطه¬ای معکوس کاهش پیدا کرده بود، اما با وجود این کاهش، از لحاظ آماری معنی دار نبود. اگر چه میزان تکوین سلولی نیز همانند میزان تسهیم، از لحاظ آماری تفاوت معنی داری را نشان نداد، اما گروه کنترل بیش¬ترین و گروه تیمار شده با 200 میکرومولار لینولئیک اسید کم¬ترین تکوین به مرحله هشت را سلولی نشان دادند. هم چنین میزان بیان ژن bax در گروه تیمار شده با 200 میکرومولار لینولئیک اسید بیش¬تر از سایر گروه¬های تیماری بود. نتیجه گیری: مطالعه حاضر نشان داد که اضافه کردن لینولئیک اسید به محیط کشت اثرات منفی بر روی تکوین رویان گوسفند دارد، اگر چه نتایج حاصل از این مطالعه معنی¬دار نبود. این اثرات منفی در غلظت 200 میکرومولار بیش¬ترین و در غلظت¬های 50 میکرومولار و 100میکرومولار کم¬تر مشاهده شد. هم چنین لینولئیک اسید منجر به افزایش بیان ژن bax شد، که می¬تواند نشان دهنده تأثیر لینولئیک اسید بر آپوپتوز باشد.